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單B細胞抗體制備技術服務

單B細胞技術,也被稱為單個B細胞抗體制備技術,是一種快速制備單克隆抗體的新技術。它基于單細胞水平的Ig反應性分析,利用細胞分選或測序技術,獲取表達抗體基因,再通過體外表達的方式,短時間內可以迅速獲得大量特異性單克隆抗體。每個B細胞只含有一個功能性重鏈基因和一個輕鏈基因序列,因此只產生一種特異性抗體。

與傳統(tǒng)的雜交瘤技術和噬菌體展示技術相比,單B細胞抗體技術具有開發(fā)周期短、通量高、陽性克隆多、親和力高等優(yōu)勢。最重要的是,通過單B細胞抗體技術獲得的抗體能確保輕鏈和重鏈天然配對。

單B細胞技術已廣泛應用于制備抵抗病原微生物感染的高度特異性人源抗體,如HIV抗體、破傷風抗體、乙肝抗體、流感抗體等。此外,它還在腫瘤、自身免疫性疾病和器官移植等領域顯示出獨特的優(yōu)勢和良好的應用前景。

華美生物提供一站式單B細胞抗體制備服務,具備快速交付、高通量、高特異性和親和力等優(yōu)勢,涵蓋從免疫原設計到抗體生產及對應檢測方法開發(fā)的完整流程,確保為客戶提供高品質的抗體解決方案。

鼠單B細胞抗體制備流程

圖. 鼠單B細胞抗體制備流程

服務優(yōu)勢:

快速交付

高通量

高親和力與特異性

服務內容:

階段 服務內容 交付 周期
動物免疫
  • 抗原制備(可選)
  • 動物免疫
  • 效價檢測

交付內容:

  • 1. 陽性克隆的抗體重鏈及輕鏈序列;
  • 2. 質量檢驗報告 (CoA)。

交付標準:

  • 1. ELISA-Binding檢測;
  • 2. FACS-Binding 檢測。
3-4周
(最快8天可獲得功能性抗體及2ml小試上清)
B細胞分選
  • 脾臟淋巴細胞分離
  • 抗原標記
  • 流式分選
擴增與克隆
  • PCR擴增
  • 載體構建
抗體快速小量表達與驗證
  • 小量表達抗體
  • ELISA檢測
  • 流式檢測
陽性克隆測序
  • 陽性克隆
  • 測序
重組抗體表達與純化(可選)
  • 轉染級質粒制備
  • 瞬時轉染表達
  • 高通量純化
  • 無內毒素純化

交付內容(可選):每個陽性克隆0.1-0.5mg純化抗體

交付標準:純度 > 95%

2-4周

鼠單B抗體交付案例:

細胞分選
細胞分選

完整新鮮脾臟,預計分選可獲得3000個以上的目的細胞

細胞擴增陽性率高
細胞擴增陽性率高
線性表達載體構建
線性表達載體構建
獲得的抗體進行FACS驗證
獲得的抗體進行FACS驗證